偶看新闻钢铁果实:与核酸有关的几种酶的功能及作用位点
来源：百度文库 编辑：偶看新闻 时间：2024/07/04 05:13:23
1、限制性核酸内切酶（有时简称限制酶）：限制酶主要存在于微生物（细菌、真菌等）中。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶（基因工程的工具之一—剪刀）。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子（例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开）。目前已经发现了200多种限制酶，它们的切点各不相同。在重组DNA技术和基因诊断中必备的一类工具酶是能切割DNA分子得到黏性末端。 DNA限制酶作用于磷酸二酯键 。
2、DNA连接酶：主要是在DNA片段之间的磷酸二酯键的形成起连接作用，基因工程所用工具酶之一。DNA连接酶作用于磷酸二酯键。
3、DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用。DNA聚合酶也作用于磷酸二酯键。
二、DNA聚合酶与DNA连接酶的区别：
1、二者作用对象有差异：DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。
2、二者二者作用条件有差异：DNA聚合酶以一条DNA脱氧核苷酸链为模板，将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA单链；而DNA连接酶是将DNA双链上的相邻两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。
三、与DNA转录有关的酶——RNA聚合酶
RNA聚合酶又叫RNA复制酶或RNA合成酶）。RNA聚合酶以DNA的一条链上的具有遗传效应的结构及功能单位——即基因为模板合成RNA，转录时DNA的双链结构部分由解旋酶解开，转录后DNA仍然保持双链的结构。相对来说，真核生物RNA聚合酶较复杂，细胞核内有三种RNA聚合酶：RNA聚合酶I转录rRNA，RNA聚合酶II转录mRNA，RNA聚合酶III转录tRNA和其它小分子RNA。它们都在RNA复制和转录中起作用。
四、由RNA指导的DNA合成有关的酶——反转录酶
反转录酶：反转录酶是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。主要包括以下几种活性。①DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。②RNA酶活性；由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子，将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子。③DNA指导的DNA聚合酶活性；以反转录合成的第一条DNA单链为模板，以dNTP为底物，再合成第二条DNA分子。除此之外，有些反转录酶还有DNA内切酶活性，这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用，目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板，在反转录酶的作用下，合成出互补的DNA(cDNA)，由此可构建出cDNA文库(新教材)，从中筛选特异的目的基因，在基因工程中起重要作用。
五、DNA复制、转录离不开的酶——解旋酶
解旋酶：是一类解开氢键的酶，由水解ATP来供给能量它们常常依赖于单链的存在，并能识别复制叉的单链结构。在细菌中类似的解旋酶很多，都具有ATP酶的活性。大部分的移动方向是5'→3'，但也有3'→5'移到的情况。DNA解旋酶作用于氢键，在DNA复制、转录中期重要作用。